Stress ossidativo: kits per ricerca e routine

Stress ossidativo: kits per ricerca e routine

Lo stress ossidativo rappresenta uno squilibrio tra la manifestazione sistemica delle specie reattive dell’ossigeno (ROS) e la capacità del sistema biologico di disintossicare prontamente gli intermedi reattivi o di riparare il danno risultante. Uno squilibrio nel normale stato redox delle cellule può causare effetti tossici attraverso la produzione di perossidi e radicali liberi che portano al danno cellulare. Il danno include l’ossidazione di proteine, lipidi e DNA, alterando così, spesso in modo irreversibile, le strutture chiave delle cellule.

Molti fattori come l’infiammazione, la malnutrizione, gli sport eccessivi, lo stress, i farmaci o le tossine ambientali possono spostare il bilancio ossidativo in modo sfavorevole con effetti molto gravi: lo stress ossidativo è considerato un fattore significativo per lo sviluppo e la manifestazione di molte malattie.

Le principali:

  • Cancro
  • Malattie neurologiche e psichiatriche come il morbo di Parkinson e l’Alzheimer, la schizofrenia, il disturbo bipolare, la sindrome X fragile, l’autismo e la sindrome da stanchezza cronica;
  • Sintomi e malattie cardiovascolari come disfunzione endoteliale, aterosclerosi, ipertensione, insufficienza cardiaca, infarto miocardico;
  • Diabete;
  • Insufficienza renale cronica;
  • Malattie autoimmuni;
  • Invecchiamento precoce;
  • Malattie della pelle: lichen planus, vitiligine.

Tuttavia, le specie reattive dell’ossigeno sono anche necessarie in una certa quantità per rimanere in salute. Appartengono al sistema di difesa non specifico del nostro sistema immunitario e sono usati per attaccare e uccidere gli agenti patogeni. Gli antiossidanti come le vitamine ci proteggono dall’impatto negativo dei ROS funzionando come spazzini dei radicali, stabilendo e mantenendo un bilancio ossidativo.

Il giusto equilibrio tra le specie reattive dell’ossigeno e gli antiossidanti è fondamentale per una vita sana.

I nostri test consentono di monitorare l’esposizione allo stress ossidativo a vari livelli con parametri diversi:

1. Stato ossidativo e antiossidativo

2. Enzimi  generatori e degradanti dei radicali liberi

3. Antiossidanti

4. Molecole modificate (lipidi, proteine, frazione di zucchero, DNA)

5. Predisposizioni genetiche

6. Biomarker aggiuntivi per lo stress ossidativo

1. Stato ossidativo e antiossidativo

PerOx (TOS / TOC)

Il nostro dosaggio PerOx (TOS, “stato ossidativo totale”) ha brevi tempi di incubazione ed è facile da usare e potrebbe essere utilizzato per misurare i lipidoperossidi totali. Prevede una semplice preparazione del campione in piccole quantità. Determina la capacità ossidante completa.

EDTA plasma / serum:

  • good < 200 μmol/l
  • low oxidative stress 200 – 350 μmol/l
  • high oxidative stress > 350 μmpl/l

Sample volume: 20 μl

Matrix: Serum, EDTA plasma

Test principle: colorimetric

Cat. No. IMM-KC5100

ImAnOx® (TAS/TAC)

Il dosaggio della capacità antiossidante ImAnOx® (TAS, “stato antiossidativo totale”) è veloce e facile da usare. E’ stato progettato per essere utilizzato con piccole quantità di campione. Determina la capacità antiossidante completa.

EDTA-Plasma / Serum:

  • low < 280 μmol/l
  • acceptable 280 – 320 μmol/l
  • good > 320 μmpl/l

Sample volume: 40 μl

Matrix: Serum, EDTA plasma

Test principle: colorimetric

Cat. No. IMM-KC5200

2. Enzimi  generatori e degradanti dei radicali liberi

IDK® MPO (Myeloperoxidase)

• Marcatore per attività infiammatorie nel tratto gastrointestinale

• Stress ossidativo (siero)

• Rigetto del trapianto di rene (urina)

• Distinzione tra asma allergica e infezioni causate dall’asma (lavaggio bronchiale, condensato respiratorio, espettorato)

Reference Values MPO:

  • Stool < 2000 ng/ml
  • Serum mean value 340 ng/ml (SD 176.7)
  • EDTA-Plasma mean value 98.31 ng/ml (SD 62.9)

Matrix: Plasma, Serum

Sample volume: 100 μl (Pl.); 25 μl (Ser.)

Test principle: ELISA

Cat. No. IMM-K6631B

3. Antiossidanti

Haptoglobin

L’aptoglobina è una proteina abbondante in fase acuta. La sua funzione principale, la neutralizzazione dell’emoglobina libera, è essenziale per la prevenzione del danno del tessuto ossidativo.

Il nostro kit è il primo ELISA adatto per la determinazione nella routine del fenotipo Hp.

Haptoglobin Typing

Sample volume: 15 μl

Matrix: Serum, Plasma

Test principle: ELISA

Cat. No. IMM-KSA71001

Vitamin C (Ascorbic acid)

La vitamina C sierica e plasmatica si trova sia come acido ascorbico che nella forma ossidata: deidrato-ascorbato. Entrambe le forme sono biologicamente attive. Nel nostro test della vitamina C viene indotta un’ossidazione prima della determinazione dell’analita, in modo che entrambe le forme siano misurate.

Disponibile come colorimetric MTP-Assay o HPLC-Kit.

Vitamin C con Colorimetric MTP-assay

  • Sample volume: 200 μl
  • Matrix: Li-Heparinate plasma, Serum, Urine
  • Cat. No. IMM-K4000
  • Reference value Vitamin C: Li-Heparinate plasma 4 – 15 mg/l

Vitamin C (HPLC)

  • Flow rate: 0.75 ml/min
  • UV-Detector: 254 nm
  • Sample volume: 200 μl
  • Elution: isocratic
  • Matrix: Li-Heparinate plasma
  • Tests: 100
  • Cat. No. IMM-KC2900

Vitamin A/E (Retinol/Tocopherol) – HPLC

Semplice preparazione del campione (solo una fase di precipitazione)

Standard interno

Tempo di esecuzione totale <15 min

Controllo di qualità esterno continuo mediante test interlaboratorio

Reference Values Vitamins A / E

Vitamin A (Serum) 200 – 800 μg/l

Vitamin E (Serum) 3 – 14 mg/l

Flow rate: 0.8 ml/minl

UV-Detection

Vitamin A: 325 nm;

Vitamin E: 300 nm

Sample volume: 250 μl

Matrix: Serum, Plasma

Elution: isocratic

Tests: 100

Cat. No. IMM-KC1600

Ubiquinone / Coenzyme Q10 – HPLC

Primo kit reperibile in commercio per la determinazione di Ubichinone.

Lo standard interno viene eseguito nel cromatogramma dopo il Q10; quindi nessun risultato falso-negativo.

Reference Values Ubiquinone / Coenzyme Q10:

EDTA blood / EDTA plasma 0.67 – 0.99 mg/ml

Flow rate: 0.8 – 1.2 ml/min

Detection UV: 275 nm

Sample volume: 100 ml

Elution: isocratic

Matrix: EDTA-blood; EDTA-plasma, Serum

Tests: 100

Cat. No. IMM-KC1700

Glutathione (GSH/GSSG) – HPLC

Determinazione della forma ossidata (GSSG) e ridotta (GSH) del glutatione

Standard interno

La fase mobile può essere ricircolata

Reference Values Glutathione:

EDTA-whole blood

total: 763 – 1191 mmol/l

reduced: 620 – 970 mmol/l

Flow rate 0.75 – 1.0 ml/min

Detection Fluorescence:

Ex.: 385 nm; Em.: 515 nm

Sample volume: 100 μl

Elution: isocratic

Matrix: EDTA whole blood

Tests: 100

Cat. No. IMM-KC1800

4. Molecole modificate (lipidi, proteine, frazione di zucchero, DNA)

Oxidized LDL (ox-LDL) / MDA Adduct

Misurazione dell’LDL ossidato come marker per la perossidazione lipidica.

Il nostro kit ELISA ox-LDL / MDA Adduct riconosce l’apolipoproteina B 100 modificata MDA, contenente meno di 60 unità MDA per molecola.

Autoantibodies against oxidized LDL (anti ox-LDL)

Rilevazione di autoanticorpi contro LDL ossidato

Uso di LDL ossidate Cu2+

Tempi di incubazione brevi (<3 h)

Malondialdehyde (MDA)

Marker per danno ossidativo

5 minutes run time

Reference Values MDA:

EDTA-plasma: < 1 μmol/l

ox-LDL/MDA Adduct

Matrix: Serum, EDTA Plasma, dried blood

Sample volume: 10 μl (Ser., EDTA pl.) 50 μl (dried blood)

Test principle: ELISA

Cat. No. IMM-K7810

anti-ox-LDL

Sample volume: 50 μl

Matrix: EDTA-Plasma, Serum

Test principle: ELISA

Cat. No. IMM-K7809

MDA (HPLC)

Flow rate 0.8 – 1.0 ml/min

Detecion Fluorescence:

Ex: 532 nm, Em. 550 nm

Sample volume: 20 μl

Elution: isocratic

Matrix: Plasma, Serum, Urine

Tests: 100

Cat. No. IMM-KC1900

Carbonyl Protein

Test ultra sensibile per la determinazione delle proteine carbonilate

Adatto anche per campioni poveri in proteine!

Solo 10 μl di campione

Risultati in sole 6 ore

AOPP

Determina solo le proteine ossidate

Buffer pronto all’uso per diluire campioni e standard

Standard termostabile liofilizzato

Test di piccole quantità di campione

Produce risultati rapidi

8-OHdG

Maneggevolezza

Determinazione nelle urine

Versione ad alta sensibilità per la determinazione nel siero e plasma

Carbonyl Protein

Sample volume: 10 μl

Matrix: Serum, Plasma

Test principle: ELISA

Cat. No. IMM-K7870

AOPP (MTP assay)

Sample volume: 125 μl

Matrix: EDTA-Plasma

Test principle: photometric

Cat. No. IMM-K7811w

8-OHDG

Sample volume: 100 μl

Test principle: ELISA

Matrix: Urine Cat. No. IMM-KA4000

Matrix: Serum, tissue Cat. No. JAI-KOGHS10E

5. Predisposizioni genetiche

MutaGEL® OxStress I

(Endothelial NO-Synthase (eNOS) + NAD(P)H Oxidase)

Sample volume: 200 μl

Matrix: DNA (e.g. whole blood, cheek swab)

Test principle: PCR (RFLP)

Cat. No. IMM-KE09008

MutaGEL® OxStress II

(Superoxid Dismutase [SOD2] + Catalase)

Sample volume: 200 μl

Matrix: DNA (e.g. whole blood, cheek swab)

Test principle: PCR (RFLP)

Cat. No. IMM-KE09011

MutaCHIP® TOXO

(Determination of detoxification risk factors)

Sample volume: 200 μl

Matrix: DNA (e.g. whole blood, cheek swab)

Test principle: Gene Chip with MAAT-reader system

Cat. No. IMM-KF390011

MutaPLATE® GST-M1/T1  MutaPLATE® GST-P1

Matrix: DNA e.g. whole blood, cheek swab)

Sample volume: 200 μl

Test principle: real time PCR (open systems)

Cat. No. IMM-KF1902196 MutaPLATE® GST-M1/T1 (TM)

Cat. No. IMM-KF1903196 MutaPLATE® GST-P1 (TM)

6. Biomarker aggiuntivi per lo stress ossidativo

ADMA / ADMA Xpress

SDMA

L-Citrulline

C-reactive Protein (CRP)

IDK® PMN Elastase

Relaxin

Thiol-Status (Sulfhydryl status test)

Nitrotyrosine

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